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Starvio siRNA轉染實驗指南--換液問題

轉染后需不需要換液這個問題要根據(jù)每個小核酸轉染試劑的要求來,市面上大部分的轉染試劑都會建議在轉染4-6h后進行換液。那為什么會有轉染后的換液需要呢?主要有以下兩種原因:

第一種,有的轉染試劑在開始轉染前即鋪板時就要求使用不含血清的培養(yǎng)基,因為血清會對轉染效果有影響,但是細胞的生長需要血清提供營養(yǎng),在無血清的環(huán)境下只能存活幾個小時,所以轉染后必須更換完全培養(yǎng)基以維持細胞正常生長。

第二種,轉染試劑本身毒性比較大,轉染后如果不將培養(yǎng)基換掉,可能會對細胞造成嚴重死亡,因此會要求轉染4-6小時后進行換液。

但是,對于毒性很低的Starvio siRNA轉染試劑來說,是不需要換液的,并且血清對轉染效果沒有影響,這點是很多轉染試劑所不具備的。如果大家是初次實驗,那么你做實驗的時候一定要嚴格按照產(chǎn)品說明書上針對是否需要換液的要求來,而不是自己去決定要不要換液以及什么時候換液。我們所參考的產(chǎn)品說明書,其實都是通過研發(fā)人員進行了多次實驗得出來的一個最優(yōu)解。我們首先應該相信這些最優(yōu)解,按照操作步驟去做,才能保證最大程度的發(fā)揮出試劑的性能。

另外,也要提醒一下大家,有些同學也許之前使用過好幾種品牌的轉染試劑,或者想用不同品牌的轉染試劑一起做平行對比實驗,很可能在這個過程中會混淆各個產(chǎn)品的操作流程及注意事項,比如對不需要換液的產(chǎn)品在操作中進行了換液處理,以至于出現(xiàn)轉染效果不佳的情況,這是一個及其容易被忽略但又是十分重要的問題,希望大家引起重視,嚴格根據(jù)各個說明書要求進行實驗。

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